Western Blot 曝光室里的刑侦大片：为什么你的 ECL 发光液和法医查凶案血迹是同一个配方？
1985 年 9月26日 · ECL 化学发光A/B液（鲁米诺 + 过氧化氢）、HRP 二抗与冷 CCD 化学发光成像仪
你知道吗？
法医在凶案现场寻找血红蛋白里的铁离子，你在 PVDF 膜上寻找 HRP 二抗里的血红素铁离子；你们在黑暗中等待的那抹 $425\text{ nm}$ 幽蓝星光，来自同一个鲁米诺分子的跃迁。
在侦探悬疑剧或《名侦探柯南》里，你一定见过这样的经典桥段：凶手把地板上的血迹擦得一干二净，法医走过来关掉电灯，拿喷壶往地上一喷，地板上瞬间浮现出幽幽的蓝紫色荧光！如果此时你手里正端着刚配好的 Western Blot ECL 发光液（A液和B液等体积混匀） 准备去成像仪曝光蛋白条带，恭喜你——你手里端着的，正是法医喷壶里一模一样的“鲁米诺（Luminol，3-氨基邻苯二甲酰肼）”！
在凶案现场，鲁米诺与双氧水混合后，是靠血液血红蛋白里的铁离子（）催化氧化，生成激发态的 3-氨基邻苯二甲酸根离子，在退回基态时释放出波长 的蓝光；而在你的 PVDF 膜上，二抗尾巴上绑着的辣根过氧化物酶（HRP）活性中心恰好也揣着一颗血红素铁离子（Heme Iron），干的是完完全全同一份催化活！
不过，早期单纯用鲁米诺加双氧水发光有个致命缺陷：亮一下就灭了，光强微弱到必须躲在暗房里贴着 X 光胶片苦熬几个小时。直到 1983 至 1985 年间，英国伯明翰大学的 Whitehead 与 Thorpe 团队发现了神奇的“增强型化学发光（Enhanced Chemiluminescence, 即 ECL）”：只要在鲁米诺A液里加一点点对碘苯酚（p-Iodophenol）作为电子传递增强剂，发光强度就会瞬间暴涨 1000 倍以上，而且能稳定亮上整整一个小时，彻底解放了全球研究生的暗房之苦！