活死细胞的百年生死判官“台盼蓝”:为什么活细胞泡在蓝墨水里依然白白净净?
1904 年 7月25日 · 0.4% 台盼蓝(Trypan Blue)染液、牛鲍氏血球计数板与自动细胞计数仪
你知道吗?
活细胞的磷脂膜是一道势利眼的安检门,绝不放带四个负电荷的台盼蓝大胖子进屋;一旦你在显微镜下看到哪颗细胞变成了蓝精灵,说明它的城门已经彻底塌了。
在细胞房消化完细胞准备传代或种板前,你总会吸 细胞悬液和 深蓝色的台盼蓝(Trypan Blue)混匀,滴进血球计数板塞到显微镜下一看:圆润透亮、白白净净的是活细胞,而浑身变成深蓝色“蓝精灵”的则是死细胞!
为什么这瓶蓝药水一眼就能看穿细胞的生死?而且它为什么取了个这么怪的名字叫“Trypan(台盼)”?这要追溯到 1904 年现代化学疗法之父、诺贝尔奖得主保罗·埃尔利希(Paul Ehrlich)的实验室。当年埃尔利希正在疯狂筛选能杀死非洲睡眠病元凶——锥虫(Trypanosoma)的化学染料,他合成的这款蓝色偶氮染料因为能有效杀灭锥虫,被直接命名为 Trypan Blue(杀锥虫蓝)!
后来细胞学家发现,台盼蓝分子结构上挂着整整 4 个带负电的磺酸基(),分子量高达 。对于健康的活细胞来说,完整的磷脂双分子层细胞膜具有极其严格的“选择透过性”,这种又大又全身带负电的偶氮染料根本钻不进去(哪怕钻进一点也会被活细胞膜上的外排泵一脚踹出来),所以活细胞在蓝墨水里依然晶莹剔透;可一旦细胞死亡,细胞膜千疮百孔失去屏障功能,台盼蓝大军便长驱直入,瞬间与胞内变性暴露的碱性蛋白质紧密结合,在几秒钟内给死细胞盖上一枚蓝色的“死亡印章”!