去垢剂的暴脾气与温柔乡：为什么做 Co-IP 用了强 RIPA 裂解液，互作蛋白就全跑光了？
1973 年 7月15日 · SDS、Triton X-100、NP-40 与 RIPA 细胞裂解液
你知道吗？
SDS 是冲进屋里把房梁和夫妻俩一起拆成零件的暴力拆迁队，而 Triton X-100 只是悄悄拆掉泥巴外墙、让屋里手拉手的小情侣毫发无伤的温柔搬家工。
实验室里经常发生这样的惨案：师弟想做免疫共沉淀（Co-IP）验证蛋白 A 和蛋白 B 手拉手结合在一起，结果他图省事，直接拿平时跑 Western Blot 提总蛋白用的强 RIPA 裂解液（含高浓度 SDS 和脱氧胆酸钠）去裂解细胞。
最后跑胶一看，诱饵蛋白 A 抓下来一大堆，互作蛋白 B 却连个鬼影都没有！为什么？这完全取决于你手里的“去垢剂（Detergent，俗称表面活性剂）”到底是个莽夫还是个绅士！1973 至 1975 年间，芬兰生物化学家 Ari Helenius 与 Kai Simons 发表了阐明去垢剂与膜蛋白相互作用的奠基性综述。
去垢剂分子都是一头亲水、一头疏水的“两面派”，但脾气天差地别：像 SDS（十二烷基硫酸钠）这种头部带负电的强阴离子去垢剂，简直是拆家狼牙棒——它的单体不仅能融化细胞膜，还会强行钻进蛋白质肚子里的疏水核心，靠静电斥力把蛋白质的三维折叠撑爆成一根直挺挺的面条，原本靠微弱氢键和疏水力抱在一起的 A 和 B 当场劳燕分飞！
相反，像 Triton X-100 或 NP-40 这类头部不带电的非离子去垢剂则是温柔的绅士，它们的临界胶束浓度（CMC）很低，只会像替身演员一样温和地顶替掉细胞膜上的磷脂分子，把蛋白质完好无损地从膜上“请”进水里，连最脆弱的蛋白复合体都能紧紧牵着手不散伙。