无水乙醇要加2.5倍，为什么异丙醇只要0.7倍就能把DNA拽下来？
1972 年 3月25日 · 无水乙醇 & 异丙醇 & 3M 醋酸钠 (pH 5.2)
你知道吗？
醇类负责扒光DNA身上的水分子防弹衣，钠离子负责扑上去中和负电荷——而70%乙醇里的那三成水，则是洗掉多余盐分的点睛之笔。
做过质粒大提、TRIzol提RNA或者胶回收的同学，对这两个铁律一定倒背如流：如果要用无水乙醇沉淀核酸，必须加入1/10体积的3M醋酸钠（pH 5.2），再加入2到2.5倍体积的冰无水乙醇（1.5 mL EP管往往根本装不下！
）；而如果换用异丙醇（Isopropanol），只需要加入0.6到0.7倍体积，哪怕在室温下晃一晃，就能立刻看到一团白花花的DNA沉淀析出来！为什么同样是醇类，异丙醇的沉淀效率比乙醇猛这么多，却又让人不敢随便乱用？答案藏在物理化学的“介电常数（Dielectric Constant, ε）”里！
DNA之所以能溶解在水里，是因为水是极性极强的分子（20℃时介电常数高达80），水分子不仅在DNA外围裹了一层厚厚的水化层，还把带正电的钠离子（Na+）和带负电的DNA磷酸骨架隔开，防止它们结合沉淀。当你往水里倒进介电常数很低的乙醇（ε≈24）时，溶液整体的介电常数断崖式下跌，水分子也被乙醇抢走，这时醋酸钠里的Na+趁虚而入，死死吸在DNA磷酸负电荷上中和电荷，失去水化层又没了电荷斥力的DNA只好抱团沉淀。
而异丙醇比乙醇多了一个疏水甲基，介电常数更低（ε≈18），夺水和压低介电常数的能力强悍得多，所以0.7倍体积就够了！但硬币的反面是：异丙醇对无机盐的溶解度也极差，极易把高浓度的盐分和蔗糖跟DNA一起共沉淀下来，而且挥发极慢，所以不管你用谁沉淀，最后都必须用70%乙醇洗一遍把盐洗掉！