试错1639次之后的破茧:为什么养悬浮细胞要用RPMI-1640?
1967 年 2月6日 · RPMI-1640 培养基
你知道吗?
当你拧开那瓶印着1640的橘红色液体时,你倒出的是六十年前前辈们倒掉1639瓶失败培养基后留下的唯一正解。
在细胞房里有一条不成文的鄙视链:皮实的贴壁肿瘤细胞(如HeLa、293T)喝DMEM就能疯长,而娇贵的悬浮免疫细胞(T细胞、B细胞、THP-1、Jurkat)以及许多原代肿瘤细胞,却非得喝“RPMI-1640”不可。很多人好奇这串像机器人代号一样的字母和数字到底是什么意思?
其实,“RPMI”是美国纽约州水牛城的“罗斯威尔帕克纪念研究所(Roswell Park Memorial Institute)”的缩写,而“1640”真的就是字面意思——第1640号培养基配方!20世纪60年代初,研究所所长George E. Moore博士立志要在体外建立起人类正常淋巴细胞和白血病细胞的长期培养系,但骨髓和外周血里的白细胞一旦离开人体血管,在当时的普通培养基里撑不过几天就会全军覆没。
Moore带着团队开启了地狱级的排列组合试错:他们模拟人体血液微环境,大幅降低了钙镁离子浓度以防止悬浮细胞抱团贴壁,加入了还原型谷胱甘肽对抗氧化应激,并采用了独特的磷酸氢二钠/碳酸氢钠缓冲体系。在经历了整整1639次不够完美的配比调整后,1640号配方终于让人类淋巴母细胞在体外实现了生生不息的传代,并在1967年2月正式发表于《JAMA》。