英国纺织厂染羊毛衫的剩料,怎么成了蛋白胶的当家花旦?
1963 年 1月15日 · 考马斯亮蓝染色液 (Coomassie Brilliant Blue)
你知道吗?
从十九世纪约克郡的蓝色羊毛衫,到二十一世纪分子实验室的SDS-PAGE,它靠疏水与静电的双手紧紧抓住了每一根多肽链。
跑完SDS-PAGE蛋白胶,不想大费周章做抗体孵育时,我们总会把胶泡进一盒深蓝色的“考马斯亮蓝(Coomassie Brilliant Blue R-250或G-250)”里摇晃半小时,洗脱后一条条清晰的蓝色蛋白带便跃然胶上。
但很少有人知道,这个听起来无比高大上的名字,其实带着浓重的19世纪殖民历史与纺织工业色彩。1896年,英国约克郡的染料制造商Levinstein Ltd开发出一种能把羊毛衫染成鲜艳亮蓝色的三苯甲烷类酸性染料;为了庆祝当年英军攻占西非阿散蒂帝国(今加纳境内)的首都库马西(Kumasi,旧拼写为Coomassie),老板把这种羊毛染料命名为“考马斯”。
整整67年后,澳大利亚国立大学的微生物学家Stephen Fazekas de St. Groth为了看清醋酸纤维素薄膜上少得可怜的流感病毒蛋白,把纺织厂的样品册翻了个底朝天,在1963年1月发表论文指出:考马斯亮蓝染色灵敏度比当时主流的氨基黑(Amido Black)高出整整10倍!
在酸性甲醇溶液中,染料的磺酸负离子与蛋白质的碱性氨基酸(精氨酸、赖氨酸)正电荷结合,同时芳香环贴紧疏水口袋,不仅能染胶,还在1976年催生了经典的Bradford蛋白定量法。