造纸厂废液里的防冻神药:为什么冻细胞非加10% DMSO不可?
1959 年 3月28日 · 细胞冻存液 (90% FBS + 10% DMSO)
你知道吗?
它常温下是伤细胞的微毒溶剂,零下196度时却是替细胞挡住亿万把冰晶匕首的贴身软猬甲。
所有进细胞房的新手背诵的第一条铁律就是:冻存细胞必须配含10% DMSO(二甲基亚砜)的冻存液,放到程序降温盒里以每分钟1℃的速度慢冻;复苏时则必须在37℃水浴锅里1分钟内猛晃融化(慢冻快融)。要是忘了加DMSO直接把细胞丢进-80℃冰箱,第二天拿出来看到的只会是一锅细胞碎片汤。
这是因为纯水在结冰时会排列成规整的六方晶格,长出无数锋利如匕首的“冰晶刺刀”,不仅直接戳穿脆弱的磷脂双分子层,还会在结冰过程中把未冻的盐分挤在狭小缝隙里,让细胞在高渗盐水中严重脱水皱缩致死!1959年3月28日,英国科学家James Lovelock与Christopher Bishop在《Nature》发文揭晓了救星:原本作为木材造纸工业副产物的DMSO,分子极小且兼具亲水亚砜基与疏水甲基,能比甘油快数十倍地轻松穿透细胞膜。
一旦进入细胞内部,DMSO就会凭借极强的氢键结合力死死抱住水分子,像楔子一样拆散水分子的四面体氢键网络,让细胞内外的水分在超低温下形成温顺无棱角的“玻璃态(Vitrification)”,从而护住活细胞穿越零下196摄氏度的液氮深渊。