前臂皮肤上迟到四十八小时的硬结：佛罗伦萨·塞伯特与结核菌素 PPD 试验
1934 年 12月1日 · 结核菌素纯化蛋白衍生物预充注射液（PPD 5 TU）、1 mL 一次性蓝芯结核菌素注射器与透明硬结卡尺
你知道吗？
它不会像花粉过敏那样几分钟内让人打喷嚏，免疫系统用了整整七十二小时的迟到红肿，在皮肤上庄严签名。
很多人小时候在前臂内侧经历过一针皮下鼓起“皮丘”的皮试，护士会千叮咛万嘱咐：“千万别抓，等两三天后再来量硬结大小！”这就是沿用至今的结核菌素试验（Mantoux test）。早年罗伯特·科赫曾使用粗提的结核菌培养浓缩液（旧结核菌素 OT），但由于含有大量杂质多糖与培养基焦糖变性蛋白，常常引发不可控的剧烈非特异性毒性坏死。
1934年，美国宾夕法尼亚大学亨利·菲普斯研究所的女生物化学家佛罗伦萨·塞伯特（Florence B. Seibert）利用精巧的微孔超滤膜与三氯乙酸沉淀技术，终于从结核分枝杆菌无蛋白合成培养基滤液中提取出了性质均一、高纯度的“纯化蛋白衍生物（PPD）”，彻底解决了诊断假阳性难题。
PPD试验是病理生理学上最典雅的“迟发型超敏反应（IV型变态反应）”活体展示：当微量PPD注入真皮浅层后，如果受试者曾感染过结核菌或接种过卡介苗，体内的致敏记忆Th1细胞会在血管壁慢条斯理地识别局部抗原提呈，随后大量泵送干扰素-γ等细胞因子；招募而来的单核巨噬细胞如潮水般涌向皮下，在48至72小时后交织浸润成一个摸起来硬邦邦的红色隆起硬结。