旋转试管壁上的绝对无氧冰霜:罗伯特·亨盖特与厌氧滚管培养技术
1950 年 1月1日 · 丁基橡胶塞 Hungate 厌氧培养试管、除氧加热还原铜管气体吹扫台与滚管冰水旋转槽
你知道吗?
在氧气足以致命的微观深渊,试管内壁那一层凝固的无氧冰霜,就是极端生命唯一的避风港。
在自然界广袤的深海泥沙、沼泽泥炭以及反刍动物牛羊的瘤胃深处,生活着庞大的厌氧微生物军团,它们是地球碳循环与纤维素消化的真正主力。然而直到20世纪中叶,人类对专性厌氧菌的培养几乎一片空白,因为这些极端厌氧菌哪怕暴露在含有一丝氧气的空气中几秒钟,体内缺乏过氧化氢酶与SOD的脆弱细胞就会被狂暴的氧自由基彻底毒死!
加州大学戴维斯分校的罗伯特·亨盖特(Robert Hungate)以其神乎其技的玻璃仪器工程学设计了“厌氧滚管技术(Hungate Roll-Tube Technique)”。实验中,培养基全程被通入无氧高纯CO2吹扫,气体必须先流经加热到350℃的还原铜线柱以吃掉所有残存微量氧;在灌入含有半胱氨酸还原剂的熔融营养琼脂后,用无毒丁基橡胶塞配合铝盖密封。
趁着琼脂尚未凝固,将试管平放在盛满碎冰水的高速滚轴上飞速旋转,滚动的离心力让琼脂在管内壁均匀铺展成一张薄如蝉翼的圆筒状透明凝胶!细菌在此薄层上形成互不干扰的独立单菌落,为现代瘤胃生态学与肠道菌群研究奠定了绝对基石。