绵羊红细胞草坪上的单细胞弹孔：尼尔斯·耶尔内溶血空斑测定法
1963 年 5月18日 · 0.7% 低熔点软琼脂培养皿、新鲜豚鼠脱纤血清（天然补体源）与低倍体视解剖镜
你知道吗？
每个分泌抗体的浆细胞都是一位孤独的炮手，在红细胞构成的茫茫人海里为自己炸出一片绝对真空的透明领域。
在流式细胞术发明之前，免疫学家只能把成千上万个细胞捣成肉泥测量总抗体滴度，根本无法回答核心问题：一个动物体内究竟有多少个活淋巴细胞正在全负荷制造抗体？1963年5月，后来荣获诺贝尔奖的丹麦理论免疫学家尼尔斯·耶尔内与诺丁在《Science》发表了极具巧思的“溶血空斑试验（PFC Assay）”。
他们将刚注射过绵羊红细胞免疫的小鼠脾脏单细胞悬液，与高浓度的绵羊红细胞共同混合在微温（45℃）的薄层软琼脂里，均匀倒在皮氏培养皿表面凝固。在37℃培养箱孵育数小时后，单个活化的特异性浆细胞会向四周连续不断地泵送分泌型抗体分子。
抗体结合到周围紧贴着的红细胞表面抗原上；此时往凝胶表面缓缓覆上一层新鲜的豚鼠血清（提供补体），补体蛋白顺着结合了抗体的红细胞迅速级联打孔！奇迹发生了：原本红彤彤一片浑浊的红细胞草坪上，在短短几十分钟内炸开了一颗颗直径几十微米、边缘清晰透明的圆形小天窗！
显微镜下，每个透光溶血空斑的圆心，端坐着唯一一个正在奋力分泌抗体的活体B淋巴细胞。