万里挑一的分子减法淘金：麦德华与戴维斯减法杂交克隆 T 细胞受体
1984 年 3月8日 · 羟基磷灰石微晶层析柱（Hydroxyapatite Chromatography）、逆转录酶与低熔点琼脂糖电泳槽
你知道吗？
如果找一根针太难，就用强力磁铁把草堆里的草全部吸走，剩下的自然就是真金。
20世纪80年代初，B细胞抗原受体的分子结构早已一清二楚，而负责指挥整个细胞免疫大军的T细胞受体（TCR）却依旧是如幽灵般的未解之谜。多方团队尝试用常规抗体钓取蛋白皆因表达量极低而惨败。1984年3月，斯坦福大学的马克·戴维斯与加拿大多伦多大学的麦德华（Tak Mak）各自独立发表了震惊世界的破局方案——“减法杂交克隆”。
他们深刻洞察到：成熟T细胞与B细胞执行98%相同的通用细胞代谢功能，两者的mRNA文库几乎完全重合，唯有TCR等极少数功能分子独属T细胞。戴维斯团队将膜结合多聚核糖体分离的T细胞mRNA逆转录为32P标记的单链cDNA，随后加入过量B细胞mRNA进行液相分子杂交；由于共有序列全部形成RNA-DNA杂交双链，通入羟基磷灰石层析柱时被磷酸钙晶体牢牢吸附，唯独那2%无法配对的T细胞特异单链cDNA顺利洗脱！
凭借这把神奇的“分子减法剪刀”，两人同期在《Nature》上彻底破译了TCR β链的全长序列。