十亿欧姆封接下的皮安电流方波:内尔、萨克曼与全细胞膜片钳
1981 年 8月1日 · 火焰抛光硼硅酸盐玻璃微吸管(Tip < 1 μm)、高阻千兆欧姆封接(Gigaseal)与微电极低噪声前置放大器
你知道吗?
用一根烧得通红的微米玻璃针尖,在颤抖的活细胞膜上吻出一道十亿欧姆的绝缘鸿沟;当皮安级的方波跃上荧屏,那是生命底层的离子闸门在微风中开合的声音。
在20世纪70年代之前,神经电生理学家虽然知道神经冲动是靠钠钾离子跨膜流动产生的,但霍奇金和赫胥黎的离子假说始终缺乏最后的微观实锤——究竟是细胞膜上真有一扇扇微小的蛋白质“门”,还是离子以某种宏观弥散方式渗漏?这道谜题由德国马普生物物理化学所的埃尔温·内尔(Erwin Neher)与贝尔特·萨克曼(Bert Sakmann)用极其精细的手工物理实验解开。
他们用微电极拉制仪将极细的硼硅酸盐玻璃管尖端拉制成内径不足一微米的尖嘴,并在火焰下精细抛光。当这根充有电解质的微吸管在显微镜下轻触细胞膜表面、并施加极其轻柔的微弱负压抽吸时,奇迹发生了:玻璃表面与细胞质膜脂质分子在物理贴合下发生紧密接触,形成电阻大于十亿欧姆()的电绝缘屏障——著名的“千兆欧姆封接(Gigaseal)”。
这道绝缘神墙彻底消除了背景热噪声渗漏,使通过玻璃尖端封盖的唯一一颗离子通道蛋白质的电流成为电路中的主导信号。当科研人员在低噪声高阻抗放大器屏幕上凝视信号时,一排排干净利落、在基线与皮安()之间瞬间跳变的长方形电流方波赫然跃出!