给花朵洗个舒服的菌液澡:克劳夫与本特开创农杆菌侵染拟南芥花浸法
1998 年 12月1日 · 根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens GV3101)、有机硅表面活性剂 Silwet L-77 与正在开花的拟南芥植株
你知道吗?
最顶级的颠覆性创新,往往就是把原本在无菌手术室里精雕细琢的繁文缛节,变成泥巴盆里痛痛快快的一泡。
在植物分子生物学的漫长开局阶段,制造一株转基因植物往往意味着要像园艺师兼外科医生一样在超净台里坐穿数年冷板凳:你必须小心翼翼地切取植物叶盘或下胚轴,用含有植物激素的配方诱导其脱分化形成软绵绵的愈伤组织,在抗生素抗性平板上筛选后再极其痛苦地诱导再分化出不定芽与不定根,整个过程周期动辄半年,且伴随着极高概率的体细胞克隆变异与无菌苗污染。
1998年伊利诺伊大学的史蒂文·克劳夫与安德鲁·本特彻底解放了全世界的植物学家。他们发明了简单粗暴到近乎魔幻的“花浸法(Floral Dip)”。研究人员将含有双元T-DNA质粒的根癌农杆菌摇到高浓度,仅仅加入千分之几具有超强浸润渗透力的有机硅表面活性剂Silwet L-77以及微量蔗糖,随后将整盆刚刚抽出花序、正在含苞待放的拟南芥植株直接“头朝下”倒扣,将所有花朵在菌液中浸泡短短几秒钟!
Silwet强力破坏花器表面的疏水蜡质层,农杆菌顺势长驱直入未闭合的心皮组织,直抵正在发育的雌配子体,将T-DNA定点转入未受精的胚珠中。几个月后采收种子并在含抗生素的琼脂平板上播种,绿油油的抗性幼苗如雨后春笋般破土而出,植物遗传学就此迎来平民化狂欢。