单拷贝严控的极客防线：静矢博纪与西蒙打造 BAC 细菌人工染色体
1992 年 9月15日 · 大肠杆菌 F 因子复制子载体（pBAC108L）、0.1 cm 电转杯与脉冲场凝胶电泳仪
你知道吗？
在分子的世界里，暴饮暴食是灾难的温床，唯有极简与克制才能守护最沉重的基因蓝图。
当酵母人工染色体（YAC）因频繁发生嵌合体错拼和同源重组丢失而让测序中心焦头烂额之际，加州理工学院的静矢博纪与梅尔文·西蒙于1992年开辟了另一条惊艳的工程退路：重新拥抱结构简单的大肠杆菌，但必须给它戴上最严厉的“节育环”。
他们从大肠杆菌天然致育因子（F因子）中提取了控制单拷贝复制的核心基因元件oriS、repE以及负责质粒均等分配的parA和parB，拼接构建出微型单拷贝载体pBAC108L。与普通高拷贝质粒动辄成百上千个拷贝不同，BAC在每个大肠杆菌细胞内被机械性地死死限制在1到2个拷贝。
这种近乎禁欲的超低拷贝状态，使外源片段在菌体内发生异常重组交叉的概率直接下降了数个数量级！配合电穿孔技术将数百微克DNA轰入DH10B超级感受态细胞，BAC能够极其稳定地容纳高达300 kb的外源人类基因组片段，历经上百代繁殖无任何缺失或重排。
BAC彻底取代YAC，成为人类基因组计划最终全线冲刺的黄金功勋战车。