煮沸、紫外线照射都杀不死的侵染原:普鲁西纳用蛋白酶 K 耐受性确立朊蛋白假说
1982 年 4月9日 · 羊瘙痒病仓鼠脑匀浆超速离心沉淀、高浓度蛋白酶 K(Proteinase K)消化反应管与SDS-PAGE电泳银染胶条
你知道吗?
生命最深沉的恐怖,不需要一行突变的基因代码,只需将同一张多肽扑克牌翻折成死亡的构象。
自克里克提出中心法则以来,“核酸是一切生命遗传与感染复制的终极物质基础”成为不可侵犯的绝对神圣真理。然而羊瘙痒病(Scrapie)、疯牛病与人类克雅氏病(CJD)等致死性传染性海绵状脑病的病原体,却如同一具来自异次元的鬼魂:无论用能够瞬间摧毁一切病毒细菌核酸的超高剂量254 nm紫外线暴晒、核酸内切酶消化、补骨脂素交联,还是剧烈高压干热灭菌,其致命传染滴度竟然毫发无伤!
1982年加州大学旧金山分校的神经病学家斯坦利·普鲁西纳(Stanley Prusiner)顶着全世界权威的嘲笑与围剿,开展了极其残酷的生化提纯实验。他用患病叙利亚金仓鼠的脑组织进行数十级超速离心沉淀,获得了高滴度的感染纯品。
普鲁西纳向样品管中加入极高浓度、足以将绝大多数普通球状蛋白水解成单氨基酸碎片的凶猛广谱丝氨酸蛋白酶——蛋白酶K(Proteinase K)。在SDS-PAGE变性凝胶银染谱上,正常宿主脑组织提取的同源膜蛋白(PrPC)在几秒钟内被完全化为乌有;