双丝氨酸/苏氨酸受体激酶的磷酸化接力：马萨格揭开 Smad 异源三聚体基因抑制开关
1994 年 7月28日 · 125I-TGF-β1 配体交联共沉淀离心管、Flag/HA双表位标签质粒以及磷酸化特异性抗体转印膜
你知道吗？
生命在控制自身过度繁衍的刹车踏板上，精巧地串联了两道互为校验的丝氨酸磷酸化安全锁。
转化生长因子-β（TGF-β）是生物界最耐人寻味的细胞因子之一：它在正常上皮细胞中是铁面无私的增殖刹车闸，能直接强效下调c-Myc并诱导p15/p21表达锁定细胞周期；而在晚期恶性肿瘤中却常常反转为促进上皮-间质转化（EMT）和剧烈纤维化的恶魔。
然而在20世纪90年代初，与酪氨酸激酶受体（RTK）研究的火热相比，TGF-β家族膜受体如何向下传讯完全是一片生化黑洞。斯隆-凯特琳癌症纪念研究所的西班牙裔生化学家霍安·马萨格（Joan Massagué）使用高比活度的125I放射性同位素标记重组TGF-β1配体，并利用双功能化学交联剂二琥珀酰亚胺基辛二酸酯（DSS）与活细胞膜受体共价交联。
通过对不同受体突变体的分步纯化和功能重组，马萨格确立了前所未有的双重受体复合物激活范式：二聚体TGF-β配体首先招募具有自发激活活性的II型跨膜受体激酶（TβR-II）；紧接着，TβR-II作为上游激酶，精准在I型受体（TβR-I）近膜端极其保守的富含甘氨酸-丝氨酸的“GS结构域”上连续钉入数个磷酸根！