干扰素刺激后瞬间入核的转录因子：达内尔在 EMSA 滞后胶上绘出 JAK-STAT 捷径
1994 年 6月3日 · 干扰素-α/γ刺激后的HeLa细胞核提取物、[γ-32P]放射性标记DNA寡聚探针与凝胶迁移阻滞实验（EMSA）非变性胶板
你知道吗？
生命在遭遇强敌入侵时最致命的军令，从细胞哨卡到中枢指挥所只有两名传令兵的距离。
在经典的受体信号转导模型中，细胞表面受体感知配体后，通常需要经历漫长而曲折的多级激酶级联放大（如cAMP-PKA、MAPK三级激酶瀑布），信号才能最终层层渗透进入细胞核启动基因表达。然而当白细胞遇到病毒入侵分泌干扰素（IFN-α/γ）时，宿主抗病毒基因的转录激活却在短短几分钟内以不可思议的暴风骤雨之势全面爆发。
洛克菲勒大学的詹姆斯·达内尔（James Darnell）与伊恩·克尔（Ian Kerr）决心弄清这道超音速信号回路。他们用放射性[γ-32P]末端标记了一段干扰素刺激应答元件（ISRE）特异性DNA寡聚探针，通过非变性PAGE凝胶迁移阻滞实验（EMSA）监测细胞核提取物中DNA结合蛋白的动态。
令人震惊的是，在未经刺激的细胞核中没有任何探针迁移阻滞复合物；而一旦向培养基滴入微量干扰素，几分钟内高分子量迁移滞后条带便爆裂般浮现！达内尔团队通过纯化和肽段测序，揭开了这条几乎没有任何中间杂质的极简通路：细胞因子受体本身不具备激酶活性，但在胞内尾部紧密结合着非受体酪氨酸激酶JAK；