沸腾乙醇瞬间淬灭的暗反应:卡尔文“棒棒糖”扁平反应器与碳同位素定格
1948 年 4月30日 · 双层扁平圆形“棒棒糖”玻璃光合反应器(Lollipop Reactor)、14C-碳酸氢钠与双向纸层析展层槽
你知道吗?
用五秒钟的暴烈沸醇,把阳光固定成糖分子的那一个闪瞬永远铭刻在胶片上。
在加州大学伯克利分校的旧辐射实验室里,梅尔文·卡尔文(Melvin Calvin)与安德鲁·本森(Andrew Benson)正在操作一台造型奇特的实验装置。为了让密集的小球藻(Chlorella)悬液能够接受均匀且极强的人工光照,他们吹制了一个扁平如硬币、中间夹着冷却水套的双层玻璃圆形反应器,外形酷似一根巨大的玻璃“棒棒糖”(Lollipop Apparatus)。
反应器顶部有通气管,底部则连着一个大口径旋塞阀,正下方放置着盛有沸腾无水乙醇的烧杯。实验开始时,强光照射悬浮的小球藻,助手用注射器迅速注入放射性14C标记的碳酸氢钠;经过精确计时的短短5秒甚至2秒后,卡尔文猛地拧开底阀,绿色的藻液如飞瀑般坠入沸腾的乙醇中,所有细胞内的酶促反应在毫秒内被热变性彻底冻结!
随后,他们将提取液浓缩点在巨大的沃特曼滤纸上,用酚-水和正丁醇-丙酸进行双向纸层析展开,再将黑白X光胶片压在干燥纸层析谱上曝光数月。当暗房胶片显影时,在复杂的黑斑中,一个孤独而刺眼的放射性黑点占据了绝对主导——3-磷酸甘油酸(3-PGA)。
由此,二氧化碳如何转化为糖类的“卡尔文循环”全貌被逐一破译。